降解植物甾醇产9α-羟基雄烯二酮工程菌株构建及发酵工艺优化

摘要：

9α-羟基雄烯二酮(9α-OH-AD)作为一种不可替代的甾体药物中间体,是合成多种皮质类甾体激素类药物的重要原料.本研究通过在产雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)的菌株Mycobacterium sp.TFZ中表达3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)基因kshA和kshB,获得了一株可直接转化植物甾醇生产9α-OH-AD的工程菌株Mycobacterium sp.TFZ3215,然后以9α-OH-AD产量为评价指标,对油水两相转化体系中添加乳化剂吐温的种类和含量进行优化.研究结果表明:与出发菌株Mycobacterium sp.TFZ相比,工程菌Mycobacterium sp.TFZ3215发酵液中9α-OH-AD的含量由1.7％提高到94.7％,AD的含量由80.1％减少到3.4％.进一步通过在油水两相发酵体系中添加2g/L的吐温-80后,9α-OH-AD的产量由1.69 g/L增加到7.53 g/L,提高了3.4倍.本研究成功构建了高产9α-OH-AD的工程菌株,并对油水两相发酵体系进行了优化,9α-OH-AD的产量达到7.53 g/L,具有极好的产业化前景.

关键词：分枝杆菌、植物甾醇、9α-羟基雄烯二酮、3-甾酮-9α-羟基化酶、工程菌株构建、降解、发酵工艺

所属期刊栏目：41

分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：国家重点研发计划国际合作专项2017YFE0112700

在线出版日期：2020-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：101-107