N-糖基化对重组木聚糖酶XynA酶学特性的影响

摘要：

为实现木聚糖酶的高效表达,扩大实际生产应用,本实验将木聚糖酶基因xynA在毕赤酵母中进行重组表达,同时采用糖基化抑制剂衣霉素处理毕赤酵母细胞,以此来探讨N-糖基化对木聚糖酶XynA酶学性质的影响.结果表明,SDS-PAGE电泳图谱显示木聚糖酶XynA发生了N-糖基化修饰,分子量约为45 kDa,酶活为406.6 U/mL,最适pH及反应温度分别为5.0和65℃;而添加不同浓度衣霉素处理后的木聚糖酶最适pH不变,最适反应温度下降5℃,随着衣霉素浓度的增加,去糖基化的木聚糖酶酶活力、分泌量及温度稳定性均有所下降,且当衣霉素添加浓度为15 μg/mL时,剩余酶活为53.6％.去糖基化的木聚糖酶耐受胃蛋白酶的能力较糖基化的有所增强,Na+、K+、Li+、Ca2+、Al3+、EDTA相对于糖基化的木聚糖酶表现出了一定的激活作用.以上结果说明N-糖基化作为一种重要的翻译后修饰对木聚糖酶XynA的分泌及热稳定性有促进作用.

关键词：N-糖基化、木聚糖酶、衣霉素、酶学性质

所属期刊栏目：39

分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金项目31501416

在线出版日期：2018-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：137-143,160