脱氧雪腐镰刀菌烯醇的环七肽模拟表位筛选

摘要：

利用噬菌体随机环七肽库筛选脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)模拟表位.以DON单抗为靶分子,四轮固相淘选噬菌体随机环七肽库,筛选出阳性噬菌体,并通过ELISA实验检测其特异性.对阳性克隆的DNA进行测序,取序列不同的阳性克隆,分别建立阳性噬菌体与DON标准品的竞争抑制曲线.对30个噬菌体单克隆进行活性测定,结果显示能与DON单抗结合的噬菌体克隆有28株,其中的22株能被DON标准品阻断与DON单抗结合.DNA测序结果显示,21株阳性噬菌体的序列是PFPNHPY,另一株的序列是TPWTQHL.其相应噬菌体与DON毒素标准品的竞争曲线结果显示,8号噬菌体建立的竞争抑制曲线线性范围是0.0292～0.636μg/mL,IC50为0.169 μg/mL;4号噬菌体建立的竞争抑制曲线线性范围是0.0124～0.271 μg/mL,IC50为0.058 μg/mL.在随机环七肽库中筛选到TPWTQHL和PFPNHPY两个DON模拟表位,可替代DON毒素标准品,建立DON的免疫学无毒检测技术.

关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇、噬菌体展示技术、模拟表位

所属期刊栏目：38

分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：“十一五”国家科技支撑计划项目2008BAK42B05

在线出版日期：2018-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：133-136,147