鸡蛋过敏原卵转铁蛋白标准物质候选物的研究

摘要：

目的:制备高纯度的鸡蛋过敏原卵转铁蛋白,并详细表征其理化性质及免疫学性质,满足标准物质候选物的质量要求.方法:通过两步柱层析法制备卵转铁蛋白并分装、冻干,然后借助质谱鉴定身份;采用SDS-PAGE银染方法鉴定纯度,圆二色光谱、荧光光谱和核磁共振表征高级结构;利用Bradford法检测含量和SDS-PAGE银染方法评估稳定性,间接ELISA方法评估其与IgE结合能力.结果:制备的蛋白经质谱鉴定为鸡蛋卵转铁蛋白,分子量约79.55 ku,等电点为6.85,纯度高达94.6％;结构分析显示,制备的卵铁蛋白保留了其天然结构特性,并且冻干未使卵转铁蛋白的结构产生明显的变化;在4℃条件下储藏5个月,卵转铁蛋白的含量、纯度、结构和免疫学活性均无明显变化.结论:制备的卵转铁蛋白可作为标准物质候选物.

关键词：鸡蛋过敏原、卵转铁蛋白、标准物质候选物

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分类号：TS253.4(食品工业)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划项目2013AA102205;科技部国际科技合作项目2013DFG31380;国家自然科学基金31301524;江西省自然科学基金计划20133ACB20009,20142BAB214001;食品科学与技术国家重点实验室项目SKLF-ZZA-201612,SKLF-QN-201514.

在线出版日期：2017-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：342-347