海产品中霍乱弧菌、副溶血性弧菌和单增李斯特菌三重荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

目的:建立一种同时定量检测霍乱弧菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌的三重PCR方法.方法:依据霍乱弧菌CTX遗传单元中zot毒力基因;副溶血性弧菌TDH中tl基因;单增李斯特菌hly基因,设计特异性引物探针,建立和评价了检测试剂盒性能.结果:霍乱弧菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌浓度在102～105 cfu/mL标准曲线线性相关系数分别为0.9998、0.999、0.9963.三种致病菌105 cfu/mL与103 cfu/mL两种检测浓度对数值,批内变异系数分别为0.40％、0.83％、0.49％与0.75％、0.81％、0.64％;0.76％、1.03％、0.62％与1.06％、0.72％、1.26％;0.62％、0.51％、0.81％和1.38％、0.76％、2.34％;批间变异系数分别为0.58％与0.76％;0.83％与1.01％;0.66％与1.58％.检测灵敏度分别为:23、16、35 cfu/mL.结论:本文所建立的检测试剂盒适合于海产品等产品中三种致病菌的快速筛检.

关键词：霍乱弧菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌、多重荧光定量PCR

所属期刊栏目：38

分类号：TS254.7(食品工业)

资助基金：上海市科委技术标准课题13DZ05022702;上海市晨光计划13CGB25.

在线出版日期：2017-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：81-86