食品中荧光假单胞菌双重PCR法检测体系的建立和评价

摘要：

根据荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)促旋酶(gyrase)的B亚单位基因以及金属蛋白酶(apr)基因设计出两对引物,经过反应条件的优化,建立了用于荧光假单胞菌快速检测的双重聚合酶链式反应(PCR)方法,并对该体系进行评价.结果显示,Pseudomonas fluorescens菌株经普通PCR扩增均可见2条特异性条带(384 bp和194 bp),而其它阴性对照菌株PCR扩增均为阴性.基于基因组DNA的双重PCR检测灵敏度为16.9 fg/μL(3～4拷贝/μL),1.8CFU/mL的UHT牛奶样品(250 mL)经增菌24 h后用该双重PCR方法均可检出.本研究建立的双重PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏度,能克服乳制品样品基质的干扰,可应用于乳制品中荧光假单胞菌的快速检测.

关键词：荧光假单胞菌、gyrB基因、apr基因、双重PCR、食品检测

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分类号：TS252.7(食品工业)

资助基金：“十二五”国家科技支撑计划课题2012BAD12B08;上海市科学技术委员会工程中心能力提升项目16DZ2280600;上海市科委优秀技术带头人计划15XD1520300.

在线出版日期：2016-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：294-299,303