莲子多酚氧化酶的分离与纯化

摘要：

由多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)导致的酶促褐变严重影响莲子的外观.本研究旨在探讨莲子PPO的提取纯化方法,为研究其蛋白结构、进一步探究莲子褐变机理提供理论依据.以酶活力和酶比活力为指标,对比了提取PPO的四种方法,发现匀浆吸附后丙酮沉淀法提取莲子PPO可获得较高的酶比活力,达289.04U/mg;采用单因素实验对该提取方法进行优化,得最佳提取参数为:料液比1∶5、提取时间2h、pH=7、含2％ PVPP和0.8％ TritonX-100提取溶液,优化后PPO粗酶液酶比活力为294.40U/mg;采用DEAE Sepharose Fast FLow阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶柱层析对粗酶液进行纯化,得到分子量大约为58ku莲子PPO,酶比活力为7926.68U/mg,纯化倍数为26.92,回收率为38.48％.

关键词：莲子、多酚氧化酶、分离纯化

所属期刊栏目：37

分类号：TS255.1(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金31301578;江西省自然科学基金20132BAB214002;江西省教育厅青年科学基金GJJ13024;江西省自然青年科学基金20142BAB214003.

在线出版日期：2016-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：64-68