H-NS基因作为靶基因的荧光定量PCR快速检测海产品中的副溶血性弧菌

摘要：

目的:建立一种利用SYBR Green Ⅰ荧光PCR反应快速、准确、便捷检测副溶血性弧菌的方法.方法:根据副溶血性弧菌的H-NS基因的保守区域设计引物,利用副溶血性弧菌的标准菌株以及12株其他种属的常见致病菌对引物的特异性和灵敏度进行评价.基于该基因利用SYBR Green Ⅰ荧光PCR检测方法建立标准曲线,确定该检测方法的灵敏度.对用不同浓度的菌液污染的灭菌过的蚬子样品进行检测,确定该方法的的可行性.最后用该方法检测30份蚬子样品,并与国标GB4789.7-2013检测结果进行比较.结果:用H-NS基因作为靶基因检测副溶血性弧菌的SYBRGreen Ⅰ荧光PCR检测方法,建立的标准曲线的相关系数为0.998,检测灵敏度为7.3×10 CFU/mL.人工污染蚬子的检出限为6.7×102 CFU/mL.对蚬子样品的检测结果为30份样品中有4份含有副溶血性弧菌,与国家标准方法(GB4789.7-2013)的检测结果具有一致性.结论:表明该方法可以用于副溶血性弧菌的快速检测.

关键词：副溶血性弧菌、SYBR Green Ⅰ、荧光定量PCR、H-NS基因

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分类号：TS207.4(食品工业)

资助基金：辽宁省高校重大科技平台辽教发[2011]191号;辽宁省特聘教授辽教发[2012]145号.

在线出版日期：2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：155-158,162