YDL080C和LEU2基因敲除对工业黄酒酵母异戊醇生成量的影响

摘要：

通过敲除生成途径中关键酶的编码基因,对异戊醇在工业黄酒酵母N85中的生成进行了研究.采用融合PCR技术,分别构建类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失组件“YDL080C-URA3-YDL080C”和β-异丙基苹果酸脱氢酶基因(LEU2)缺失组件“LEU2-URA3-LEU2”,转化工业黄酒酵母N85尿嘧啶缺陷型单倍体Na-u(MATa ura3),获得单倍体工程菌Na-y和Na-1.将转化子与亲本分别进行实验室规模的黄酒发酵实验,结果YDL080C缺失工程菌的异戊醇含量与亲本相比没有明显变化,说明类丙酮酸脱羧酶不是该途径关键酶;LEU2缺失工程菌的异戊醇含量降低16.16％,说明糖代谢途径存在,但只占小部分,而其他理化指标无明显差异.

关键词：异戊醇、工业黄酒酵母、类丙酮酸脱羧酶基因、β-异丙基苹果酸脱氢酶基因、基因敲除

所属期刊栏目：36

分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：食品加工过程安全控制的关键科学问题,973项目2012CB720802;工业生物过程高效转化与系统集成的科学基础研究,973项目2013CB733602;安全食品精深加工科技创新平台建设2012B091400030;食品发酵过程酿酒酵母氮代谢物阻遏效应形成机制及其调控,国家自然科学基金重点项目31130043;江苏高校优势学科建设工程资助项目;高等学校学科创新引智计划111计划资助项目111-2-06;江南大学工业生物技术教育部重点实验室开放课题KLIB-KF201308.

在线出版日期：2016-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：189-193