木瓜蛋白酶在PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO4双水相体系中亲和分配行为研究

摘要：

目的:研究木瓜蛋白酶在PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO4亲和双水相体系中分配行为.方法:采用浊点法,构建双水相相图,考察各成相剂对木瓜蛋白酶活性的影响;研究不同PEG4000和(NH4)2SO4的质量分数、不同PEG-IDA-Fe3+的取代量时,木瓜蛋白酶在两相体系中分配行为的变化;用响应面法优化亲和双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳分离条件;同时对木瓜蛋白酶在萃取体系中的结构进行表征.结果:当两相体系中pH6.9,PEG4000质量分数16％,(NH4)2SO4质量分数20％,PEG-IDA-Fe3+为3％时,木瓜蛋白酶的上相酶活性回收率达90.5％,蛋白分配系数达1.85,而其在PEG/(NH4)2SO4中的酶活回收率及蛋白分配系数都低于PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO4亲和双水相体系.结论:PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO亲和双水相系统能有效提高木瓜蛋白酶的分配效果,采用Fe3+螯合PEG成相剂的双水相萃取木瓜蛋白酶条件温和,不影响酶的特征结构.

关键词：亲和双水相、PEG-IDA-Fe3+、木瓜蛋白酶、分配行为

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分类号：TS201.1(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31260401;海南大学服务地方经济社会发展项目HDSF201306;海南大学2014年研究生科技创新项目.

在线出版日期：2015-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：205-211