棘托竹荪提取液对单增李斯特菌的抑菌机理初步研究

摘要：

在细胞超微结构观察的基础上,采用实时荧光定量PCR技术初步分析棘托竹荪提取液对单增李斯特菌的抑菌机理.使用最小抑菌浓度(15.0mg/mL)的棘托竹荪提取液分别对单增李斯特菌菌液进行0.5、1.0、1.5h处理,提取对照组与处理组菌株的总RNA,通过反转录获得各自cDNA,并选择相关基因合成引物作Real-time PCR分析.以本菌的16S rRNA作为内参基因,以pfA、ActA、Iap为转录过程与表达蛋白基因,分析提取液对单增李斯特菌相关基因表达量的影响.由细胞超微结构观察可知,单增李斯特菌经提取液处理后,菌体细胞的细胞壁变薄,细胞膜的完整性发生改变,内容物从胞内释放出来.由荧光定量PCR法对不同处理时间下的相关基因相对表达量变化情况分析得出:处理组的prfA基因在0.5h时表达量有所上调,后期表达量上调速度减慢.lh后表达量基本停止上调,1.5h后,表达量转为下调,说明提取液能在转录阶段对单增李斯特菌的生命活动构成影响.ActA和Iap基因在处理0.5h后基因表达量上调,处理1h后上调量最大,ActA基因在1.5h后表达量上调量有所降低,Iap基因表达量出现下调,说明提取液能在转录水平上调控单增李斯特菌的生命活动,特别是多种毒力因子的表达过程.由此可知,棘托竹荪提取液能对单增李斯特菌细胞的转录过程和抗性产生显著影响,使菌体的细胞膜受损,细胞质溶出,从而导致菌体细胞死亡.

关键词：棘托竹荪提取液、单增李斯特菌、抑菌机理

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分类号：TS201.1(食品工业)

资助基金：上海市教育委员会科研创新项目11YZ159;上海市科技兴农重点攻关项目沪农科攻字2015第4-12号;上海海洋大学科技发展专项基金A2-0209-15-200061.

在线出版日期：2015-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：152-155,160