响应面法优化大肠杆菌产海藻糖合酶发酵培养基

摘要：

以海藻糖合酶基因工程菌E.coli BL21 (pET15b-TreS)为研究对象,以海藻糖合酶的酶活为考察指标,对海藻糖合酶基因工程菌E.coli BL21 (pET15b-TreS)的培养基进行优化.首先运用单因素实验对大肠杆菌(E.Coli)产海藻糖合酶进行了优化,利用Plackett-Burman进行两因素两水平设计对影响其产酶因素进行评估并筛选出具显著效应的3种因素:葡萄糖、酵母浸粉和K2 HPO4.用最陡爬坡实验逼近以上三种因素的最大响应面区域后,采用Box-Behnken进行三因素三水平的设计以及响应面分析,获得最佳产海藻糖合酶的培养基.结果表明,发酵大肠杆菌的最佳培养基配方为:葡萄糖7.2g/L,酵母浸粉6.6g/L,蛋白胨10g/L,(NH4)2SO4 5g/L,K2 HPO4 15.7g/L,KH2PO4 4g/L,MgSO4·7 H2O1.6g/L,微量元素混合液0.5mL/L.在此条件下进行产酶重复实验5次,海藻糖合酶酶活为65 U/mg,比优化前提高了91.2％.

关键词：大肠杆菌、海藻糖合酶、Plackett-Burman设计、响应面法

所属期刊栏目：36

分类号：TS201.2(食品工业)

资助基金：山东省科技发展计划2011GGB01160.

在线出版日期：2015-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：181-187