嗜热脂肪芽孢杆菌耐热β-半乳糖苷酶功能位点的累积进化研究

摘要：

针对嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源耐热p-半乳糖苷酶BgaB底物结合位点构建突变体,研究底物结合位点累积突变的功能进化及水解活性的变化规律.实验结果表明:Y272A与E351R的累积突变体比酶活为野生型酶的3.67倍,为单点突变体Y272A的2倍;Y272A/E351R突变体的Km值增大,其对乳糖的亲和力下降,但由于Kcat值增大,使累积突变体Y272A/E351R催化效率提高为野生型酶催化效率的7.8倍.本研究结果表明底物结合位点间的累积突变可改变底物亲和性,并对水解催化活性进化起到正向促进作用.

关键词：β-半乳糖苷酶、嗜热脂肪芽孢杆菌、累积进化、功能位点

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分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：国家青年科学基金项目31301523;国家自然科学基金项目31171636;十二五国家“863”计划2011AA100905;安徽高校省级科学研究项目KJ2013B187;滁州学院科研启动基金资助项目2012qd14.

在线出版日期：2015-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：148-153