乳糖诱导D-塔格糖3-差向异构酶基因在大肠杆菌中的表达

摘要：

以D-塔格糖3-差向异构酶高效表达菌株BL21(DE3)/pET22b-cbdte为研究对象,考察乳糖作为诱导剂诱导D-塔格糖3-差向异构酶在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性.在摇瓶发酵条件下,从诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间及诱导温度等四个方面,研究诱导条件对目的蛋白表达的影响.结果表明,工程菌培养至对数生长中期OD值为1.0左右后,加入终浓度为5g/L的乳糖,于20℃的条件下诱导7h,可获得最大酶活.与异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)最适诱导条件相比,优化后的乳糖诱导酶活提高82.7％,可溶性目的蛋白的表达量提高99.5％,菌体生物量提高30.5％.研究结果为乳糖作为诱导剂应用于D-塔格糖3-差向异构酶的工业化生产提供有益的参考和借鉴.

关键词：D-塔格糖3-差向异构酶、乳糖、IPTG、诱导表达

所属期刊栏目：34

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金重点项目31230057

在线出版日期：2013-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：143-146,152