同种接合型酵母菌株Y2HGold的原生质体融合研究
为避开有性融合的局限性,挖掘同种接合型酵母菌株无性融合的潜在应用价值,利用质粒构建了酵母双杂交工程菌株Y2HGold的亮氨酸缺陷型和色氨酸缺陷型菌株;接着采用酶解法进行四因素三水平正交实验获得原生质体制备方案:酶解温度30℃、处理时间80min、预处理剂含0.1%(w/v)巯基乙醇和0.1%(w/v)EDTA-2Na,酶解液为1.5%(w/v)蜗牛酶和1.5%(w/v)纤维素酶混合,使得原生质体的制备及再生率分别达82%和37%;最后采用PEG诱导融合的方法,经过同样正交实验得到Y2HGold无性融合条件为:PEG浓度35%、温度25℃、时间40min、pH5.8。筛选得到的无性融合子在遗传上稳定。
酵母、原生质体、无性融合、无性融合菌株
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TS201.3(食品工业)
重庆市自然基金重点项目cstc2012jjB80010;国家自然科学基金项目30971849;国家大学生创新计划项目091063509
2012-08-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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