mPEG-SS修饰对DHPM去折叠胰蛋白酶相对活性、热稳定性和动力学参数的影响

摘要：

采用ω-琥珀酰酯酸琥珀酰亚胺酯活化的α-甲氧基-聚乙二醇（mPEG-SS）,修饰经动态高压微射流（Dynamic high-pressure microfluidization,DHPM）诱导的去折叠态（unfolding）胰蛋白酶,研究经mPEG-SS修饰后其相对活性、热稳定性、动力学（米氏常数Km、最大反应速率Vmax）变化情况。结果表明：经mPEG-SS修饰后,天然态和去折叠态胰蛋白酶的相对活性都没有明显改变;修饰后去折叠胰蛋白酶（DTP）较天然胰蛋白酶（NTP）的耐热性有明显提高,当温度为55、45℃条件下保温180min,NTP和DTP的相对活性分别提高了2%、7%和19%、30%;经mPEG-SS修饰后天然胰蛋白酶和去折叠胰蛋白酶的Km分别为4.67、3.24mg/mL,Vmax分别为0.042、0.034U/min,均比未经修饰的要小。修饰后去折叠胰蛋白酶（DTP）的Km比天然胰蛋白酶（NTP）小,表明修饰后去折叠胰蛋白酶比修饰后天然胰蛋白酶具有更强的与底物（酪蛋白）的亲和能力。

关键词：胰蛋白酶、mPEG-SS、相对活性、热稳定性、动力学参数

分类号：TS201.2(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金31060209;国家重点实验室重点青年骨干研究基金SKLF-QN-201101

在线出版日期：2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：103-105,109