脱氧雪腐镰刀烯醇(呕叶毒素)酶标抗原的合成及免疫抗体的制备
利用琥珀酸酐法合成了脱氧雪腐镰刀烯醇-琥珀酸酐衍生物(3-HS-DON),并用DCC法将该衍生物与牛血清白蛋白(BSA)偶联得到的结合物(DON-HS-BSA)作为免疫抗原免疫新西兰大白兔,获得效价为1:10000的特异性抗脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)的抗体.同时,用EDC法将3-HS-DON与辣根过氧化物酶(HRP)偶联得到酶标抗原(DON-HS-HRP).通过圆二色光谱(CD)看到偶联后蛋白二级结构发生了改变,酶活稍有下降;用分光光度法测得酶标抗原酶活损失<5%,偶联物中DON与HRP的结合比为5.29.说明:该酶偶联物及制备的抗体可作为酶联免疫吸附法(ELISA)或免疫传感器法测试脱氧雪腐镰刀烯醇时所需的酶标抗原及抗体.
脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)、辣根过氧化物酶(HRP)、抗体、酶标抗原、圆二色光谱(CD)
Q939.91(微生物学)
国家863高技术研究发展计划资助项目2007AA10Z428;国家自然科学基金资助项目20806033;十一五科技支撑计划子课题2007BAK36B06
2011-08-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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