鸭肝丁酰胆碱酯酶的纯化与酶学性质研究

摘要：

目的:获得鸭肝丁酰胆碱酯酶纯品并对其酶学性质进行研究.方法:采用丙酮脱脂、酸沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝丁酰胆碱酯酶:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子量测定.结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的丁酰胆碱酯酶.纯化倍数为156.45倍,酶活回收率为23.60%,比活达17.21U/mg.酶相对分子量为388.85kDa,亚基相对分子量为64.70kDa.推测该酶由六个相同亚基构成.该酶最大紫外吸收为278nm.酶催化碘化硫代丁酰胆碱水解的最适pH为8.0,最适温度为35℃.该酶在pH 3.0～10.0区域较稳定;在40℃以下处理1h,酶活力保持稳定.Zn2+、Mn2+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用,以碘化丁酰硫代胆碱为底物,测定该酶的表观Km为71.15μmol/L,没有过量底物抑制现象.结论:成功分离纯化获得丁酰胆碱酯酶,该酶具有较好的酸碱耐受性.

关键词：鸭肝、丁酰胆碱酯酶、分离纯化、性质

分类号：TS201.1(食品工业)

资助基金：重庆市科委资助项目CSCT;2004AC1012

在线出版日期：2011-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：95-99