双孢蘑菇中核苷酸的测定及酶解条件的研究

摘要：

建立了利用高效液相色谱法(H PLC)分离测定双孢蘑菇核酸提取液中的四种核苷酸(胞苷酸、尿苷酸、鸟苷酸、腺苷酸)的方法.采用紫外检测器,波长为260nm;色谱柱为Eclipse XDB-C18,柱温为25℃,流动相为:超纯水:甲醇:冰乙酸:四丁基氢氧化铵(TBAOH,10%)=894.5:100:5:0.5;流速为1.0mL/min;四种核苷酸标准曲线相关系数r均达到0.999利用5'-磷酸二酯酶酶解双孢蘑菇中提取制得的核酸制品,为获得酶解的最适工艺条件,通过单因素实验,在底物浓度为2mg/mL的条件下,对其酶解条件:时间、温度、pH和酶底比进行了初步研究,研究结果表明酶解的最适工艺条件:时间为3h、温度为40℃、pH为5.8、酶底比为1300U/g核酸,在该条件下核酸酶解率为68.1%.

关键词：高效液相色谱、核苷酸、双孢蘑菇、5’-磷酸二酯酶

分类号：Q524(核酸)

资助基金：国家"十一五"支撑计划资助2008BADA1B06

在线出版日期：2010-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：171-174