利用随机突变探讨影响α-淀粉酶催化活性的氨基酸位点

摘要：

α-淀粉酶广泛应用于食品、纺织、洗涤剂等轻工行业,在国内外酶制剂市场占有重要地位.而淀粉酶之所以起作用,很重要的原因是重要功能区域--催化区域的存在,而催化区域起作用又取决于催化中心的活性位点,因此,活性位点或周围碱基的改变可能会对α-淀粉酶的活性产生很大的影响.本文应用易错PCR技术对来源于Pyrococcus furiosus的α-淀粉酶进行随机突变,测定突变株的酶活,并进行测序鉴定,选取了其中的8个有效突变株作为研究对象,应用生物信息学的方法对这8个有效突变株进行蛋白质结构的分析,探讨不同位置不同氨基酸的突变对蛋白质分子的影响.选取其中酶活提高最多的突变,将该突变位点换作其余18种氨基酸,预测出其结构可能的变化趋势,探讨了各种氨基酸的介入对蛋白质结构变化的影响.

关键词：α-淀粉酶、活性位点、随机突变、空间构象、氢键

所属期刊栏目：28

分类号：TS202.2(食品工业)

资助基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划NCET-04-9704;国家高技术研究发展计划863计划2006AA020204

在线出版日期：2007-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：63-65,69