三种鱼类链球菌三重实时荧光PCR方法的建立

摘要：

对3种链球菌基因序列的分析,设计了3条TaqMan探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记.建立了三重实时荧光PCR的检测方法,同时对建立的方法进行了特异性、灵敏度、稳定性和重复性评价,并且与传统培养法进行了比较.结果显示,试验建立的方法能特异扩增出3种链球菌的标准阳性菌株;3种链球菌之间没有交叉反应;S.agalactiae的检测灵敏度约为1.52×101 CFU/mL;S.dysgalactiae的检测灵敏度约为1.33×102 CFU/mL;S.milleri的检测灵敏度约为1.76×101 CFU/mL;3种链球菌检测反应的CV值均小于5％;对采集的287份样品进行检测,共计检出5份S.agalactiae阳性样品、3份S.dysgalactiae阳性样品和1份S.milleri阳性样品与传统细菌分离鉴定的方法检测结果一致.该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性.

关键词：S.agalactiae、S.dysgalactiae、S.milleri、TaqMan探针、三重实时荧光PCR

所属期刊栏目：37

分类号：TS201.6;S852.659.6;R155.5

资助基金：海南省社会发展科技专项;国家质检总局科技计划项目;国家质检总局科技计划项目;国家质检总局科技计划项目;重庆市科技计划;海南省应用技术研究与开发专项;广东检验检疫局科技项目;广东检验检疫局科技项目

在线出版日期：2016-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：268-272