基于三重实时荧光聚合酶链反应构建黄牛和牦牛源性成分同步检测方法

摘要：

目的 建立一种拥有内源质控的三重实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,用以快速鉴定肉和乳中黄牛和牦牛的源性成分.方法 首先对黄牛肉、牦牛肉、黄牛奶、牦牛奶等 7 种动物产品进行特异性检测,同时通过稀释梯度方法验证此方法的绝对检出限(limit of detection,LOD),最后通过黄牛和牦牛肉掺假模拟试验确定该方法的相对灵敏度.结果 该方法的特异性强,能特异性地检测到来源于黄牛和牦牛肉和乳的 DNA,稳定扩增的内源质控有效地避免了假阴性结果,本方法针对黄牛奶的绝对 LOD 为2.5×10-3～5.0×10-3 ng,针对牦牛奶的绝对LOD为 2.5×10-3～5.0×10-2 ng,本方法对黄牛肉和牦牛肉混合肉的相对灵敏度可达 0.1%牦牛肉.结论 所建立的三重实时荧光PCR方法特异性强、灵敏度高,可实现黄牛和牦牛源性以及内源质控的同步检测,又能通过内源质控排除实验假阴性结果.

关键词：三重实时荧光聚合酶链反应、黄牛、牦牛、内源质控、特异性、灵敏度

所属期刊栏目：14

分类号：TS207.3;X713;TM714.3

在线出版日期：2023-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：187-195