扇贝过敏原荧光免疫层析检测方法的构建与应用
目的 构建一种简便、快速、可降低非特异性荧光干扰的时间分辨免疫层析检测方法,实现快速检测扇贝中原肌球蛋白(tropomyosin,TM)过敏原.方法 本研究采用双抗体夹心免疫层析法,以含有铕(Eu)纳米微粒的荧光微球作为标签偶联兔抗TM多克隆抗体,制备荧光探针并对其进行表征.以4 mg/mL兔多克隆抗体作为T线,羊抗兔免疫球蛋白G(immunoglobulin g,IgG)作为C线组装免疫层析试纸条.结果 本研究组建的试纸条视觉检出限为0.05μg/mL,仪器检出限为0.01μg/mL.试纸条除对虾蟹有交叉反应外,对其他10余种物种无明显交叉反应.加标样品批内和批间变异系数分别为3.71%~7.94%和12.09%~12.80%,在不含TM的4种食物基质中加入浓度由低到高的TM,检测结果与实际加标情况相符.结论 本检测方法准确性良好、灵敏度高、特异性强,可在多种食物基质中实现对扇贝TM的快速检测.
时间分辨荧光微球、免疫层析、扇贝过敏原、原肌球蛋白、快速检测
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R318;R4;R135
国家自然科学基金32072338
2023-02-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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