燕窝唾液酸糖蛋白间接竞争酶联免疫检测方法的建立
目的 建立间接竞争酶联免疫(indirect competitive enzyme linked immunesorbent assay,IC-ELISA)检测燕窝中唾液酸糖蛋白的分析方法.方法 以唾液酸糖蛋白为抗原,制备单克隆抗体,对IC-ELISA步骤中相关参数进行优化,确定最佳反应条件.结果 最佳包被抗原为1:2000,抗体稀释倍数为1:5000;封闭液浓度为1%牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),封闭时间为150 min;竞争时间30 min;酶标二抗浓度稀释倍数为1:1000,孵育时间30 min;显色时间为10 min.建立的IC-ELISA检测方法半抑制浓度(50%inhibition concentration,IC50)为8.61μg/mL,线性范围为2.23~33.25μg/mL,回收率为82.7%~92.0%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSDs)为1.7%~8.9%.结论 该方法灵敏度较高、特异性强,可以有效地鉴别假冒伪劣燕窝产品,具有较好的实际应用价值.
燕窝、唾液酸糖蛋白、间接竞争酶联免疫分析法
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TS207.53;S859.84;S435.72
海关总署科研项目2021HK198
2023-02-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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