重金属镉人工抗原的制备与鉴定

摘要：

目的 制备重金属镉人工抗原并对其进行理化性质和免疫原性鉴定.方法 以乙二胺四乙酸二钠(ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt,EDTA-2Na)或二乙基三胺五乙酸(diethylenetriaminepentaacetic acid,DTPA)为双功能螯合剂,将牛血清白蛋白(bovine albumin,BSA)和Cd2+进行螯合,制备镉人工抗原,通过二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)法、紫外全波长扫描、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、火焰原子吸收法及动物免疫对人工抗原进行分析鉴定.结果 紫外全波长扫描和SDS-PAGE初步证明人工抗原合成成功;人工抗原BSA-EDTA-Cd2+和BSA-DTPA-Cd2+的蛋白质质量浓度分别为0.9488、0.5506 mg/mL,Cd2+质量浓度分别为22.8、20.1μg/mL,说明人工抗原合成成功,且BSA-EDTA-Cd2+和BSA-DTPA-Cd2+的偶联比分别为14.2:1和21.6:1;用BSA-EDTA-Cd2+和BSA-DTPA-Cd2+分别免疫小鼠,四免后血清效价均能达到1:25600,且两组血清半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)分别达到208.88和83.91 ng,与Ba2+、Fe3+、Zn2+、Pb2+几乎没有交叉反应.结论 人工抗原BSA-EDTA-Cd2+、BSA-DTPA-Cd2+合成成功,为制备单克隆抗体和建立重金属镉快速免疫分析技术提供理论基础.

关键词：镉、人工抗原、理化性质、免疫原性

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分类号：R392-33;Q786;S852.62

资助基金：国家自然科学基金;河南工业大学创新基金支持计划专项资助项目

在线出版日期：2022-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：6915-6922