同步增菌结合实时荧光聚合酶链式反应快速检测食品中5种致病菌

摘要：

目的 实现食品中5种致病菌的同步增菌,并结合实时荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,建立快速检测的方法体系.方法 比较金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门氏菌5种目标菌分别在营养肉汤和缓冲蛋白胨水中的生长曲线;优化DNA模板提取的方法;采用实时荧光PCR技术及熔解曲线分析,建立5种致病菌的快速检测方法.结果 缓冲蛋白胨水可以作为5种目标菌的同步增菌液,增菌3 h后5种目标菌能被检出,最低检出的DNA浓度范围为10?3～10?4 ng/μL.经熔解曲线分析,5种目标菌的平均特征熔解温度(Tm)值范围为79.51～87.39℃.结论 本研究建立的5种致病菌快速检测方法,检测总时间大约为6 h,且方法灵敏度和特异性均能满足检测要求.

关键词：同步增菌、食源性致病菌、实时荧光聚合酶链式反应、熔解曲线

所属期刊栏目：13

分类号：R345.57;Q789;TS207.4

资助基金：浙江省市场监督管理局科技项目20210150

在线出版日期：2022-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：4258-4264