三七染料法实时荧光聚合酶链式反应鉴别方法的建立

摘要：

目的 采用TB Green染料法实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,基于叶绿体基因psbA-trnH序列建立鉴别三七的实时荧光PCR方法.方法 通过比较三七及其同属的人参、西洋参和竹节参的psbA-trnH序列,设计出一对三七特异性引物,优化退火温度,进行灵敏度实验,并验证方法的特异性、适用性和抗干扰性,最后对市售三七样品进行检测.同时以18S rDNA引物为内参质控,对DNA提取及反应体系进行质控.结果 所建立的三七染料法实时荧光PCR方法灵敏度为0.001 ng/μL;特异性较好,与18种近缘及常见中药材均无交叉反应;适用性和抗干扰性也较好;对28份不同加工方式的市售三七样品检测的结果与测序结果一致.结论 建立的三七染料法实时荧光PCR方法具有快速、准确、灵敏的特点,可用于三七产品中三七成分的鉴别.

关键词：三七、实时荧光聚合酶链式反应、染料法、鉴别

所属期刊栏目：13

分类号：R28;TS201.6;R977.3

资助基金：云南省重大科技专项;云南绿色食品国际合作研究中心项目;教育部重点实验室基金

在线出版日期：2022-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：894-901