mini-MPN-STE-qPCR法快速定量检测食品中沙门氏菌

摘要：

目的 建立一种快速、简易、可定量检测食源性沙门氏菌定量PCR(quantitative PCR,qPCR)方法.方法 依据沙门菌属invA基因序列设计染料法qPCR引物,建立沙门氏菌qPCR检测方法,并通过短时间增菌(short time enrichment,STE)的5管微型多管发酵计数法(mini-most probable number,mini-MPN)进行定量检测,构建mini-MPN-STE-qPCR法.使用人工污染的鸡肉混合液进行定量检测,检测结果与传统MPN计数法和平板计数法进行比较分析.结果 建立的qPCR法特异性良好,方法灵敏度为50 CFU/mL,结合48孔板min-MPN和4 h短时间增菌,建立的mini-MPN-STE-qPCR法可将整个检测流程缩短至7 h.人工添加沙门氏菌的鸡肉混合液检测结果表明方法检出限为-0.347 log MPN/mL,Bland-Altman分析结果显示,此法与传统MPN计数法相关系数r2=0.994,与平板计数法相关系数r2=0.992.结论 该方法准确、简单易行、成本低、灵敏度高,可用于食品中沙门菌的快速定量检测.

关键词：沙门氏菌;invA基因;荧光定量PCR;mini-MPN;短时间增菌;定量检测

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资助基金：浙江省市场监督管理局科研计划项目20190360、20210177

在线出版日期：2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：7246-7253