青海弧菌Q67荧光素酶基因luxAB与luxCDABE在大肠杆菌中表达与发光特性比较

摘要：

目的：对比淡水发光细菌——青海弧菌Q67荧光素酶基因luxAB和luxCDABE在新的表达体系中的表达,为构建特异性检测毒性的重组菌提供基础。方法设计引物扩增得到青海弧菌Q67荧光素酶基因luxAB和 luxCDABE,将其分别与表达载体 pET-22b 连接,转化大肠杆菌 DH5α测序,阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达。检测两种重组菌的发光特性及重金属离子对其毒性影响。结果通过测定重组菌的相对发光强度(RLU)和OD600值可知： luxAB和luxCDABE重组菌在癸醛和IPTG浓度均为1μL/mL培养基里培养第1小时后达到最大RLU,值分别为750618.5和140901.5。检测重金属离子Cd2+、Hg2+、Cr6+对重组菌的毒性, EC50(半有效浓度)值分别为： luxAB重组菌：5.160、5.129、7.097 mg/L； luxCDABE重组菌：6.137、7.643、7.736 mg/L。结论在相同培养条件下, luxAB重组菌比luxCDABE重组菌获得了更大的RLU,说明luxAB表达效果更好。重金属对重组菌的毒性影响检测, luxAB重组菌得到了更低的EC50值,进一步论证了这个观点。

关键词：青海弧菌、荧光素酶基因、重组菌、发光特性

分类号：S1 ;R3

资助基金：军队重点项目BWS11J019Fund:Supported by Key Project of PLA BWS11J019

在线出版日期：2016-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4816-4821