四川泡菜中乳酸菌链霉素抗性与抗性基因的检测
目的：探明四川泡菜中链霉素抗性乳酸菌及抗性基因的种类。方法利用含有8μg/ml链霉素的MRS初步分离泡菜液中的抗性乳酸菌，通过16S rRNA分析确定抗性乳酸菌的分类地位后，测定同种不同菌株对链霉素的MIC，并与欧洲食品安全官方机构（EFSA）建议的最低临界值比较确定抗性菌株；通过PCR扩增链霉素抗性基因strA、strB, aadA、aadE、ant(6)、aac(6')-aph(2')和aph(3')-Ⅲa，确定抗性菌株的抗性基因。结果分离到67株链霉素敏感性或抗性菌株，这些菌株分别属于Pediococcus ethanolidurans (36),Lactococcus garvieae (14),Lactobacillus buchneri (12),Lactobacillus acetotolerans (2),Lactococcus lactis(1)和Staphylococcus.spp (2)。其中Lactococcus garvieae、Lactobacillus acetotolerans、Lactococcus lactis和Staphylococcus.spp全部为抗性菌株，Pediococcus ethanolidurans中有抗性菌株20株、Lactobacillus buchneri中有7株。在抗性基因检测中，除Lactobacillus acetotolerans抗性菌株没有检测到被检基因外，其他5个种的抗性菌株中均检测到部分或全部抗性基因。strA和aph(3')-Ⅲa基因在除Lactobacillus acetotolerans外的被检菌株中均有检出，其检出率分别为50%-100%和21.4%-100%；strB基因在抗性菌株Pediococcus ethanolidurans, Lactobacillus buchneri, Lactococcus garvieae和Lactococcus lactis检测率分别为70%、42.9%、28.6%和100%；aac(6')-aph(2')基因仅在3株Pediococcus ethanolidurans、1株Lactobacillus buchneri、1株Lactococcus garvieae和Staphylococcusspp中检测到。aadA、aadE andant(6)在所有抗性菌株中都没有检测到。总体而言，strA、strB和aph(3')-Ⅲa基因在链霉素抗性菌株中的检出率高于其他抗性基因。结论当前的研究结果表明：四川泡菜中存在链霉素乳酸菌抗性菌株，这些抗性菌株对四川泡菜存在潜在安全风险。
四川泡菜、乳酸菌、链霉素抗性、链霉素抗性基因
TS2;TS3
教育部春晖项目Z2014061;四川省应用基础项目2014JY0045;四川省教育厅重点项目14ZA0110;四川省食品生物技术重点实验室项目SZJJ2014-007 Fund:Supported by Chunhui Program of the Ministry of Education of the People’s Republic of ChinaZ2014061;the Applied Basic Research Program of the Science and Technology Department of Sichuan2014JY0045;the key Research Program of the Education Department of Sichuan14ZA0110;the Key Laboratory of Food Biotechnology of Sichuan, Xihua UniversitySZJJ2014-007
2015-01-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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