生鲜牛乳总微生物基因组DNA的提取

摘要：

目的 建立高效快速提取生鲜牛乳中总微生物基因组DNA的方法.方法 以生鲜牛乳为原料,采用SDS-蛋白酶K法裂解细胞,酚氯仿有机抽提去除蛋白和醋酸钾溶液沉淀蛋白,制备样品中总微生物基因组DNA.结果 以NET(Tris·HCl,EDTA,NaCl)作为裂解缓冲液,蛋白酶K消化得到的基因组DNA纯度和产量较高,耗时较短；缓冲液选择NCT(NaCl,CaCl2,Tris·HCl)时,PCR产物特异性低于前者且产量较低.RNA酶消化对产品纯度影响不大且会降低产量.用醋酸钾(KAc)沉淀去除蛋白,操作快速简单,耗时最短,但DNA产量最低.结论 SDS-蛋白酶K法提取的生鲜乳微生物总DNA可以作为牛乳样品进一步检测的分子基础.

关键词：生鲜乳、基因组DNA、PCR扩增法

所属期刊栏目：3

分类号：TS2;S73

资助基金：国家质检总局科技计划项目2011IK228

在线出版日期：2013-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：507-512