载液组成对于卵白蛋白在非对称流场流分离通道中膜吸附和聚集行为的影响

摘要：

非对称流场流分离技术对于蛋白质等生物大分子的分析具有温和、分离范围广的特点.然而,在场流分离通道中,受载液组成的影响而产生的蛋白质与通道膜的相互作用和蛋白质在通道内的聚集行为,会影响分析物的回收率和尺寸形态,这些现象一定程度上限制了场流分离仪器的进一步应用.该文研究了载液组成对于卵白蛋白在非对称流场流分离中膜吸附和聚集行为的影响.考察了不同 pH(6.2、7.4、8.2)、阳离子种类(Na+、K+、Mg2+)及多种离子强度(0~0.1 mol/L)等条件对卵白蛋白洗脱过程的影响.结果表明 a)载液的离子强度越大,卵白蛋白的吸附和聚集行为越严重;b)pH和蛋白质的等电点 pI的相对大小决定了蛋白质的表面电荷,从而影响蛋白质的吸附聚集行为;c)二价阳离子 Mg2+更易引发通道中蛋白质的吸附和聚集.这些结果有助于今后使用非对称流场流分离技术分析蛋白质样品时,改善载液组成以获得更高的回收率,降低蛋白质聚集作用,对 AF4更广泛地应用于蛋白质生化分析中有较好的参考价值.

关键词：非对称场流分离、蛋白质聚集、载液、离子强度、蛋白质

所属期刊栏目：36

分类号：O658(分析化学)

资助基金：北京市自然科学基金7162088.Beijing Natural Science FoundationNo.7162088．

在线出版日期：2018-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：480-486