一种凝血酶亲和色谱介质的制备方法

摘要：

对凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质的制备方法进行了研究.首先使用凝血酶和溴化氰活化的琼脂糖制备凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质,然后用生色底物法考察亲和色谱介质上凝血酶的活性,以凝血酶活性为指标对最佳偶联条件进行了优化.结果表明最佳条件为使用pH8.3的Na2CO,-NaHCO,溶液(含0.5 mol/L NaCl)为缓冲溶液,凝血酶用量为每1 g色谱介质加入凝血酶200 U,室温反应10 h.在最佳条件下所制备的色谱介质有较好的稳定性,在4℃条件下存放40天,亲和介质上的凝血酶活性仍有70.6％保留.该亲和色谱介质可广泛用于含凝血酶抑制剂的天然药物筛选和分离纯化.

关键词：凝血酶、亲和色谱、生色底物法

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分类号：O658(分析化学)

资助基金：北京市自然科学基金项目7133247;北京中医药大学自主选题项目2011-JSBZZ-JS047;国家级大学生创新创业训练项目201210026034

在线出版日期：2013-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：813-816