体积排阻色谱法测定低分子量肝素抗凝血因子Xa的活性

摘要：

发展了一种基于体积排阻色谱测定低分子量肝素(LMWH)抗凝血活性的方法.利用肝素与抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)结合后可增强ATⅢ对凝血因子Xa (FXa)抑制作用的原理,通过测定加入LMWH后FXa水解其生色底物产生对硝基苯胺(pNA)这一反应的抑制程度确定LMWH的活性.首先将含有一定浓度LMWH的缓冲溶液与ATⅢ溶液混合,然后依次加入FXa和生色底物,分别孵育一段时间.底物被FXa水解,产生游离的pNA.体积排阻色谱可将小分子产物pNA与其他大分子分离开,因而可以在pNA的最大吸收波长下得到高灵敏度的测定,并且不再受其他成分的干扰.该方法重复性好,灵敏度高,极大地减少了样品的消耗量,降低了成本,并且还可进行各种复杂样品(如血浆)中LMWH抗FXa活性的监测.

关键词：体积排阻色谱、抗凝血因子Xa、低分子量肝素

所属期刊栏目：31

分类号：O658(分析化学)

资助基金：国家自然科学基金项目20975109,9713021;国家科技重大专项项目2011ZX09202-101-10

在线出版日期：2013-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：684-690