毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂和蛋白C的相互作用

摘要：

建立了毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂(protein C activator,PCA)与血浆蛋白C(protein C,PC)的相互作用.以未涂层毛细管(60.2 cm(有效长度50 cm)×75 μm)为分离柱,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)为运行缓冲液,于198 nm波长下检测.对影响五步蛇毒PCA分离的因素(如缓冲液、离子浓度)及在37.5℃下孵育不同时间的五步蛇毒PCA与PC的相互作用进行考察.方法的检出限(以信噪比为3计)为3 mg/L,线性范围为10 ～ 300 mg/L.五步蛇毒PCA迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.56％和3.8％(n=6).等体积的五步蛇毒PCA(200 mg/L)与PC(60 mg/L)孵育5 min,其结合率达到最大,且谱图中未见有PC水解的肽链.该五步蛇毒PCA可改变PC空间构象直接激活PC.该方法简单,灵敏度和分辨率高,分析结果为今后快速检测五步蛇毒PCA及其活性提供了重要的理论依据.

关键词：毛细管区带电泳、蛋白C激活剂、蛋白C、相互作用、五步蛇毒

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分类号：O658(分析化学)

资助基金：安徽省高等学校自然科学研究基金项目KJ2007B022;皖南医学院中青年科研基金项目WK201208

在线出版日期：2013-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：59-63