反相高效液相色谱法测定人肌腱中的胶原蛋白

摘要：

建立了测定人肌腱中胶原蛋白含量的高效液相色谱法.动物肌腱中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用2,4-二硝基氯苯对水解产物衍生化,然后以0.01 mol/L乙酸钠-乙酸缓冲液(pH 6.0)-乙腈(体积比为80∶20)为流动相,经反相C18柱分离,紫外检测器于360 nm波长处检测来测定羟脯氨酸的含量.羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量来计算胶原蛋白的含量.该方法对羟脯氨酸的检出限为3 μg/L,羟脯氨酸为3 μg/L～100 mg/L时与峰面积的线性关系良好;样品测定的相对标准偏差为1.95% ,加标回收率为98.4% ～110.8% .对60份人肌腱样品中胶原蛋白的含量进行了测定.所建立的方法灵敏、准确、干扰少,适用于肌腱中胶原蛋白含量的测定.

关键词：高效液相色谱法、羟脯氨酸、胶原蛋白、肌腱

所属期刊栏目：24

分类号：O658(分析化学)

资助基金：中国科学院资助项目30570469;四川省青年科技基金2001-19-0132

在线出版日期：2006-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：263-266