免疫亲和色谱特异性剔除中药方剂四逆散中的柚皮苷

摘要：

为了获得剔除柚皮苷(naringin)的中药方剂四逆散样品以供其药理活性探讨时使用,制备了抗柚皮苷抗体的免疫亲和色谱柱,用于特异性地剔除四逆散中的柚皮苷.首先合成了柚皮苷的完全抗原柚皮苷与牛血清白蛋白的结合物naringin-BSA,并用naringin-BSA对新西兰兔进行免疫获得抗血清,再将其纯化后与经CNBr活化的Sepharose 4B凝胶共价偶联制成免疫亲和色谱柱.将四逆散提取物样品溶液上样该色谱柱,洗脱,制得特异性剔除了柚皮苷的四逆散样品.由检测结果可知,naringin-BSA被成功合成.将其用于免疫新西兰兔,获得的抗血清的效价经酶联免疫吸附法(ELISA)测定达到1∶30000,抗体IgG的纯度达94% ,交叉反应率低.在IgG与Sepharose 4B合成的IgG-Sepharose免疫亲和色谱柱中,IgG的偶联率为87% .用该免疫亲和色谱柱处理四逆散后,其中所含的柚皮苷几乎完全被剔除.结果证明,利用抗柚皮苷免疫亲和色谱,能特异性地剔除四逆散或其他样品中的柚皮苷成分.

关键词：免疫亲和色谱、柚皮苷、完全抗原、特异性剔除、四逆散

所属期刊栏目：24

分类号：O658(分析化学)

资助基金：国家自然科学基金90209040

在线出版日期：2006-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：243-246