蜂毒素基因的突变与表达及其构效关系研究

摘要：

为获得保留有抗菌活性而降低溶血活性作用的蜂毒素,对其分子结构进行了改造.其中一条序列缺失Lys-7,另一条缺失Leu-9.用PCR技术获得两条新的蜂毒素基因,将其克隆到酵母表达载体pPICZα-A,获得重组质粒pPICZα-A-Mel 1和pPICZα-A-Mel 2.将2个重组质粒分别转化毕赤酵母菌GS115.筛选获得重组酵母菌对重组酵母菌培养条件进行优化,在YEPD中含甘油2%,pH为7,重组酵母菌培养48 h后,0.5%的甲醇诱导72 h,表达目的蛋白通过Tricion-SDS-PAGE确定分子质量为5.4 kD.杀菌效价分别达0.947、1.085.结果表明两条蜂毒素基因成功的在毕赤酵母中表达,经突变后表达的蜂毒素降低了溶血活性,同时保留了抗菌活性.

关键词：蜂毒素、毕赤酵母、培养条件、抗菌活性、溶血活性

所属期刊栏目：10

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30570036

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：313-319