重组人谷氧还蛋白1在大肠杆菌中表达条件的优化、纯化及活性检测

摘要：

为进一步研究谷氧还蛋白1(Grx1)的生物学功能及作用机制,将已构建的pRSETA-Grx1融合蛋白表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达,并优化表达条件,用SDS-PAGE和凝胶影像分析.结果表明,当菌体密度OD600为1.0时开始诱导,加入终浓度0.5 mmol/L IPTG,37℃,110±5 r/min振荡培养5 h,重组蛋白为可溶性,表达量达30%以上.用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白,获得蛋白质纯度达90%以上;Western印迹结果表明,该蛋白具有免疫活性;MTT结果显示,终浓度为10 mg/L Grx1重组蛋白具有保护细胞抵御500μmol/L H2O2作用(P＜0.01).

关键词：pRSETA-Grx1、表达条件优化、纯化

所属期刊栏目：10

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：黑龙江省博士后科研启动基金;黑龙江省教育厅科学技术研究项目

在线出版日期：2006-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：228-232