四环素及其衍生物诱导表达的pTet-On肺癌细胞系A549的建立

摘要：

目的:构建可受四环素诱导调控的高表达外源基因的真核表达体统A549 pTet-On细胞系.用于F10基因的功能研究.方法:将pTet-On质粒用脂质体介导法转染A549细胞, 利用G418的药物选择特性, 对转染的A549细胞进行压力筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化, 单克隆分别扩增后, 瞬时转染pTRE-luc(编码荧光素酶蛋白)质粒, Dox诱导表达后, 检测荧光素酶活性, 逐一筛选四环素调控高表达外源基因的A549 pTet-On细胞株.结果:成功构建了一株受Dox调控的高表达低背景的A549 pTet-On细胞株.结论:筛选的A549细胞为F10基因表达能被pTet-on诱导表达系统调控的细胞系, 为研究F10基因功能提供了理想的细胞模型.适合在此基础上对F10基因进行深入的研究.

关键词：四环素、F10基因、基因调控

所属期刊栏目：22

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2009-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：158-160