T细胞的扩增及其信号转导分子ZAP-70的检测

摘要：

目的 检测γδT细胞信号转导分子”链相关蛋白-70 (ζ-chain associated protein 70,ZAP-70).方法 分离获取健康人PBMC,用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)刺激PBMC,通过流式细胞仪检测总T细胞和γδT细胞CD69分子的动态表达;Mtb-Ag活化γδT细胞增殖培养,10d后收集细胞,用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδTT细胞:western blot方法检测VST细胞内的ZAP-70分子.结果 总T细胞和γδT细胞均在活化刺激24h时表达CD69分子达高峰,但总T细胞仅为16%,γδT细胞可达75.2%;新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4.9%,Mtb-Ag刺激培养10d后升为69.2%,免疫磁珠阳性分选后达99.3%;检测到γδT细胞内的ZAP-70分子.结论 Mtb-Ag可特异性激活γδT细胞,用Mtb-Ag刺激γδT细胞活化增殖培养,可获得大量的γδT细胞;成功地检测到细胞内ZAP-70分子,这为γδT细胞内其它分子的检测分析莫定方法学基础,也为进一步检测γδT细胞活化信号转导过程中ZAP0-70分子的激活及作用奠定基础.

关键词：Mtb-Ag、γδT细胞、ZAP-70

所属期刊栏目：9

分类号：R730.45(肿瘤学)

资助基金：上海市松江区科学技术攻关项目08SJGG40

在线出版日期：2010-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：46-49