siRNA对肺癌细胞株bcl-2基因表达的抑制(摘要)

摘要：

目的研究小干扰RNA(siRNA)对bcl-2基因表达的抑制作用.方法利用Ambion公司提供的设计软件和试剂盒,设计合成以bcl-2基因为靶标的siRNA,通过脂质体将合成的siRNA转入A549和NCI-H460细胞株,以未转染细胞和转染bcl-2的反义药物G3139为对照,经MTT法检测siRNA对细胞生长的抑制,RT-PCR检测bcl-2mRNA水平,流式细胞仪检测细胞周期的改变和bcl-2蛋白表达,反应siRNA对bcl-2表达的抑制效应.结果siRNA组与对照组细胞存活率各时间点均有显著差异(P＜0.05);与反义组在24、48h也有显著差异(P＜0.05),而72h无差异(P＞0.05).转染12h后,siRNA组bcl-2 mRNA与对照组和反义组有显著差异(P＜0.05).转染48h后,siRNA组bcl-2蛋白阳性率明显低于对照组和反义组,siRNA组和反义组细胞阻滞于S期.结论体外转录合成的siRNA可抑制A549和NCI-H46细胞bcl-2基因的表达,效率可达50%以上.

机标关键词：癌细胞株、对照组、转染细胞、流式细胞仪检测、基因表达、转录合成、细胞存活率、蛋白阳性率、抑制作用、抑制效应、细胞阻滞、细胞周期、细胞生长、设计软件、设计合成、反义药物、蛋白表达、脂质体、小干扰、试剂盒

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分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2007-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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