改良法体外培养大鼠脑膜间皮细胞
建立大鼠脑膜间皮细胞(rat meningeal mesothelial cells,RMMC)的体外原代培养模型.用机械吹打法和0.25%胰酶-0.01%EDTA轻消化法收集原代细胞,多次差速黏附处理及传代.传三代,分别进行倒置相差显微镜观察细胞大体结构、扫描电镜(SEM)观察细胞超微结构、苏木素伊红(HE)染色法观察细胞形态、细胞免疫荧光法及免疫细胞化学法鉴定细胞.结果显示:分离培养的原代细胞在倒置显微镜下为多边形,汇合时呈铺路石样排列;SEM下细胞表面可见大量密集的微绒毛;免疫荧光染色结果显示培养细胞呈细胞角蛋白抗原阳性;免疫细胞化学结果显示培养细胞呈细胞角蛋白和波形蛋白抗原阳性,第Ⅷ因子相关抗原阴性,培养细胞的纯度达96%以上.结论:本实验成功建立了RMMC培养模型,可为脑膜纤维化的形成机制研究提供理想的细胞模型.
脑膜、间皮细胞、原代培养、大鼠
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R3(基础医学)
河南省科技厅科研基金082102310016;河南省卫生厅重大课题200702008
2009-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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