鸡蛋清溶菌酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达研究

摘要：

研究从鸡输卵管组织提取细胞总RNA,根据Gene Bank中已发表的鸡溶茵酶基因序列,设计合成特异引物,合成cDNA序列,并以此为模版,PCR扩增鸡溶菌酶基因.用Xho I和Xba I对LYZ基因的PCR产物和真核表达载体pPIC6αA进行双酶切后转化到大肠杆菌(DH5α)中,构建成为真核重组表达载体pPIC6αA-LYZ.该载体经PstX I酶切线性化后,以电击转化方法导入到毕赤酵母宿主菌x-33中,经Blasticidin抗性筛选,得到鸡溶菌酶基因重组毕赤酵母菌株;甲醇96 h(发酵罐诱导 100 h)诱导表达,经Wetern-blot检测分析,基因重组工程菌株摇瓶诱导表达溶茵酶的表达量约为4 rag/1,发酵罐诱导表达的表达量约为10 mg/1.

关键词：溶菌酶、克隆、表达、毕赤酵母

所属期刊栏目：28

分类号：Q55(酶)

在线出版日期：2008-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：18-22