猫须草总黄酮对人肾透明细胞癌786-O细胞凋亡的影响及转录组学分析

摘要：

目 的:探讨猫须草总黄酮对人肾透明细胞癌786-O细胞凋亡的影响及其机制.方法:用不同浓度(0、25、50、100、200、400 μg/mL)的猫须草总黄酮干预人肾透明细胞癌786-O细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,采用膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)染色检测细胞凋亡.786-O细胞分别用0、139.9 μg/mL猫须草总黄酮干预后,采用二代高通量测序平台(Illumina Novaseq 6000)对细胞进行RNA-seq建库测序分析,获得通路相关基因,并采用RT-qPCR和Western blot进行验证.结果:①CCK-8检测结果表明,猫须草总黄酮处理人肾透明细胞癌786-O细胞后,细胞活力呈时间及浓度依赖性降低;猫须草总黄酮呈浓度依赖性地促进786-O细胞凋亡.②通过转录组测序共鉴定出2 047个差异基因,其中有773个上调,1 274个下调.基因本体论(GO)富集分析显示,差异基因主要涉及细胞应激反应、凋亡信号通路调控、外源性凋亡信号通路等过程;京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析显示,差异基因主要涉及细胞凋亡、代谢等.③通过RT-qPCR和Western blot验证几个相关基因的mRNA和蛋白表达水平,与转录组测序的趋势一致(P＜0.01).结论:通过RNA-seq测序数据分析,发现猫须草总黄酮可能通过肿瘤抑制蛋白p53(p53)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核因子-κB(NF-κB)等信号通路诱导人肾透明细胞癌786-O细胞凋亡.

关键词：肾茶、猫须草总黄酮、肾透明细胞癌、细胞凋亡、转录组测序、信号通路

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分类号：R737.9;S855.3;Q969.453.8

资助基金：国家重点研发计划2021YFC270101

在线出版日期：2023-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：48-56