康艾注射液调节Beclin 1依赖的自噬-凋亡互作改善A549/DDP细胞顺铂耐药性的研究

摘要：

目的:基于自噬-凋亡互作蛋白Beclin 1,探究康艾注射液逆转入肺腺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制.方法:①应用Kaplan-Meier Plotter在线工具分析Beclin 1与肺癌患者生存期的关系.②CCK-8法检测顺铂、康艾及康艾联合顺铂对A549(顺铂敏感的亲本细胞)和A549/DDP(顺铂耐药细胞)细胞增殖活性的影响.③Western blot法检测自噬相关蛋白(Beclin 1、ATG7、LC3)和凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3)的表达水平.结果:①应用Kaplan-Meier Plotter在线工具对BECN1 mRNA表达水平和临床病理学指标分析显示,BECN1高表达组生存期显著高于BECN1低表达组,肺腺癌组织BECN1表达水平与患者预后呈显著正相关(P＜0.001).②A549/DDP细胞的Beclin 1蛋白表达量比A549细胞高(P＜0.05).③与对照组比较,顺铂上调了A549和A549/DDP 细胞的 Beclin 1、ATG7、LC3 Ⅰ、LC3 Ⅱ 表达(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).在 A549 细胞中,顺铂干预后 Bax、cleaved caspase-3 表达增加(P＜0.01,P＜0.001),Bcl-2 表达下降(P＜0.01),且 Bax/Bcl-2 比值上调(P＜0.01);在 A549/DDP细胞中,顺铂干预后Bax、Bcl-2表达增加(P＜0.05,P＜0.01),但Bax/Bcl-2比值下降(P＜0.05).④与顺铂组比较,低、中、高浓度康艾注射液联合顺铂均能显著抑制A549/DDP细胞增殖活性(P＜0.01,P＜0.001),顺铂+低浓度康艾组Beclin 1表达降低(P＜0.001),顺铂+中、高浓度康艾组Beclin 1表达增加(P＜0.001),且顺铂+高浓度康艾组表达增加量最多(P＜0.001).⑤与顺铂组比较,低、中、高浓度康艾注射液联合顺铂均可上调ATG7(P＜0.05,P＜0.01)、LC3 Ⅰ(P＜0.01,P＜0.001)、LC3 Ⅱ(P＜0.01,P＜0.001)表达水平,且与康艾注射液的浓度升高呈正相关.Bax表达在顺铂+康艾低浓度组中降低(P＜0.05),在顺铂+康艾中、高浓度组中增加(P＜0.01);Bcl-2表达在顺铂+康艾低、中浓度组中降低(P＜0.05),在顺铂+高浓度康艾组中增加(P＜0.05);cleaved caspase-3表达与Bax/Bcl-2比值在顺铂+康艾低、中、高浓度组中均上调(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001),且cleaved caspase-3表达与康艾注射液浓度升高呈正相关.结论:康艾注射液能有效改善A549/DDP细胞顺铂耐药性,其机制可能为上调Beclin 1蛋白表达水平,调控Beclin 1介导下的细胞自噬与凋亡互作,从而导致A549/DDP细胞自噬性死亡与凋亡.

关键词：康艾注射液、非小细胞肺癌、Beclin 1、自噬、凋亡

所属期刊栏目：36

分类号：R735.2;R319;R681.8

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：41-51