3,4-二羟基苯甲醛作用星形胶质细胞减轻脑微血管内皮细胞和神经元氧糖剥夺/再灌注损伤

摘要：

目的:从神经血管单元(NVU)细胞间相互联系的角度,探讨天麻活性成分3,4-二羟基苯甲醛(3,4-DD)作用星形胶质细胞(Ast)对脑微血管内皮细胞(BMEC)和神经元氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)损伤的保护作用.方法:从乳鼠分离、培养BMEC和Ast.采用Transwell小室分别构建Ast与BMEC、Ast与PC12细胞共培养体系.将共培养细胞分为对照组、模型组、丁苯酞(NBP)干预(1×10-4mol/L)组、3,4-DD干预(1×10-7mol/L)组.药物组预先给予相应药物干预24 h后,模型组和药物组细胞均诱导OGD/R损伤.采用细胞电阻仪测定各组Transwell小室内侧细胞的跨内皮电阻(TEER)值;试剂盒检测BMEC、PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性;ELISA检测培养基中脑源性神经营养因子(BDNF)的含量;PCR检测BMEC细胞闭锁蛋白(Occludin)及PC12细胞磷脂酶C-γ(Plc-γ)的mRNA表达.结果:①Ast-BMEC共培养体系:与对照组相比,模型组TEER值、LDH活性、BDNF含量显著降低(P＜0.01),Occludin mRNA表达显著增加(P＜0.01).与模型组相比,3,4-DD干预组TEER值、LDH活性、BDNF含量以及Occludin mRNA表达均显著升高(P＜0.01),NBP干预组LDH活性、BDNF含量及Occludin mRNA表达亦显著增加(P＜0.01).3,4-DD干预组TEER值较NBP干预组明显升高(P＜0.01).②Ast-PC12共培养体系:与对照组相比,模型组TEER值、LDH活性、BDNF含量显著降低(P＜0.01),Plc-γmRNA表达显著增加(P＜0.01).与模型组相比,3,4-DD干预组LDH活性、BDNF含量及Plc-γ mRNA表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01),NBP干预组LDH活性及Plc-y mRNA表达亦显著升高(P＜0.01).结论:3,4-DD通过促进Ast释放BDNF,作用于BMEC和神经元,维持细胞间结构,增强神经元突触可塑性,进而减轻OGD/R损伤.

关键词：3,4-二羟基苯甲醛、氧糖剥夺/再灌注、脑源性神经营养因子、星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞

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资助基金：云南省科技厅科技计划项目中医联合专项重点项目[2017FF117-004；2018FF001-007;云南省教育厅科学研究基金项目

在线出版日期：2021-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：67-72,100