预知子籽提取物对HepG2细胞自噬的影响

摘要：

目的:从自噬的角度探讨预知子籽提取物(AFSE)抑制HepG2肝癌细胞增殖的分子机制.方法:①体外培养人肝癌HepG2细胞,分别给予不同浓度AFSE干预(0、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mg/ml),细胞培养24、48 h后,MTT法检测细胞增殖情况.②将HepG2细胞分为空白对照组和AFSE组(0.625 mg/ml).药物干预24、48 h后,PCR 检测自噬相关分子Beclin-1、LC3和 P62的 mRNA 表达;Western blot 检测 Beclin-1、LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ、P62的蛋白表达,并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ的比值;透射电镜观察细胞自噬体、自噬溶酶体等结构.结果:①AFSE能够有效抑制HepG2细胞的增殖,≥0.8 mg/ml AFSE作用48 h后,细胞存活率显著降低(P＜0.05).②0.625 mg/ml AFSE 作用24 h 后,P62 mRNA 表达显著升高(P＜0.01),且 LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ、P62蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).AFSE 作用48 h 后,P62和LC3的 mRNA 表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01),LC3B-Ⅱ、P62蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ蛋白表达比值亦升高.电镜观察显示AFSE干预24、48 h后,细胞内自噬溶酶体明显增多,48 h亦观察到未与溶酶体融合的自噬体.结论:AFSE能够抑制HepG2细胞增殖,其作用可能与诱导细胞自噬有关.

关键词：预知子、肝癌、自噬、细胞

所属期刊栏目：35

资助基金：上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划项目[ZY2018-2020-CCCX-2001-01;上海市教委预算内项目;上海中医药大学中医基础理论学科能力提升项目2018-2020

在线出版日期：2021-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：52-57