降脂颗粒对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肠黏膜免疫屏障的保护机制研究

摘要：

目的:基于肠道树突状细胞(DC)研究降脂颗粒对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肠黏膜免疫屏障的保护机制.方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、降脂颗粒组和益生菌组,每组10只.除正常组外,采用高脂饲料结合葡聚糖硫酸钠(DSS)的方法构建NASH大鼠模型.造模同时,益生菌组大鼠灌胃给予100 mg/kg双歧杆菌三联活菌胶囊溶液,降脂颗粒组大鼠灌胃给予0.828 g/kg降脂颗粒溶液,正常组与模型组大鼠灌胃给予等体积0.9％NaCl溶液,连续12周.末次给药后,采集血液,生化分析仪检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平;分离肝脏和结肠组织,HE染色和油红O染色后光镜下观察组织形态学变化.分离、提取并纯化肠系膜淋巴结树突状细胞(MLN-DCs),流式细胞术检测MLN-DCs表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达.将各组提取的MLN-DCs与正常大鼠CD4+T细胞进行共刺激培养,流式细胞术检测IFN-γ+ CD4+T细胞和IL-4+ CD4+T细胞的占比情况.结果:①与正常组相比,模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LDL水平均显著升高(P＜0.01),HDL水平明显降低(P＜0.05).与模型组相比,益生菌组和降脂颗粒组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、LDL水平均显著降低(P＜0.05,P＜0.01),HDL水平明显升高(P＜0.01).②模型组大鼠肝组织可见大量脂肪变性,肝细胞肿大呈不同程度的气球样变,同时伴有较多炎症细胞浸润;结肠组织可见大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润,黏膜层损伤明显.与模型组相比,益生菌组大鼠仍可见大量脂肪变性,但肝脏炎症反应明显减轻;降脂颗粒组大鼠脂肪变性、肝细胞气球样变及炎症浸润均显著改善;两组大鼠结肠组织的炎症细胞浸润均明显减少,且黏膜组织较为完整.③与正常组相比,模型组MLN-DCs表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达水平均显著增高(P＜0.01).与模型组相比,益生菌组和降脂颗粒组CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达水平均显著降低(P＜0.05,P＜0.01).降脂颗粒组MHC-Ⅱ表达水平明显低于益生菌组(P＜0.05).④与正常组相比,模型组IL-4+ CD4+T细胞占比显著升高(P＜0.01),IFN-γ+CD4+T细胞占比显著降低(P＜0.01).与模型组相比,益生菌组和降脂颗粒组IL-4+ CD4+T细胞占比显著降低(P＜0.01),IFN-γ+ CD4+T细胞占比显著升高(P＜0.01).降脂颗粒组IL-4+ CD4+T细胞占比明显低于益生菌组(P＜0.05).结论:降脂颗粒能够有效改善NASH大鼠肝功能,显著减轻肝脏和结肠组织病变,其机制可能是降低MLN-DCs表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ的表达,促进初始T细胞向Th1型分化,进而保护肠黏膜免疫屏障.

关键词：降脂颗粒、非酒精性脂肪性肝炎、树突状细胞、肠系膜淋巴结

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资助基金：上海市自然科学基金资助项目;上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划项目[ZY2018-2020-ZYBZ-20;上海市浦东新区卫计委联合攻关项目;龙华医院“龙医学者”育苗计划项目

在线出版日期：2020-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：53-60