生物酶解技术对中药知母抗真菌作用的影响

摘要：

目的:评价知母乙醇提取物及其酶水解物对常见真菌的体外抑菌活性.方法:采用回流提取法制备知母乙醇提取物,选用β-葡萄糖苷酶进行酶水解.采用抑菌圈法评价知母乙醇提取物及其酶水解物对白念珠菌的抑菌作用,采用微量液基稀释法检测其对5种常见真菌(白念珠菌、新型隐球菌、须癣毛癣菌、石膏样小孢子菌、红色毛癣菌)的最小抑菌浓度(MIC80).高效液相色谱法检测知母皂苷BⅡ(TBⅡ)和知母皂苷AⅢ(TAⅢ)的含量.结果:①知母乙醇提取物在320 mg/ml时对白念珠菌SC5314有一定的抑制作用,抑菌圈直径为6 mm;其酶水解物在27 mg/ml和13.5 mg/ml时对白念珠菌SC5314具有抑制作用,抑菌圈直径分别为16 mm和12 mm,抗真菌效果显著提高.②知母乙醇提取物对白念珠菌、新型隐球菌、须癣毛癣菌的MIC80分别为32 mg/L、16 mg/L、32 mg/L,对石膏样小孢子菌、红色毛癣菌无明显抑制作用.其酶水解物对5种真菌的MIC80均低至4 mg/L,对石膏样小孢子菌的抑制活性甚至优于氟康唑;与知母乙醇提取物相比,酶水解物的抗真菌活性均显著增强(P＜0.01).TBⅡ对5种真菌的抑制作用均较弱,而TAⅢ对红色毛癣菌、石膏样小孢子菌、须癣毛癣菌的抑制作用较强,MIC80达4 mg/L.③知母乙醇提取物中TBⅡ含量为(31.3±1.4)％,TAⅢ含量为(3.2±0.3)％;酶水解物中TAⅢ含量为(52.5±0.3)％,未检测到TBⅡ,TAⅢ的转化率为(82.6±1.7)％.结论:β-葡萄糖苷酶作用可促进知母乙醇提取物中TBⅡ转化为TAⅢ,显著提高其抗真菌活性,TAⅢ可能是知母抗真菌作用的主要有效成分之一.

关键词：知母、生物酶解、抗真菌、最小抑菌浓度、知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅡ

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资助基金：国家自然科学基金资助项目81872981;国家科技重大专项项目2019ZX09201004-002;上海市卫计委面上项目201740152;上海市卫计委优秀青年医学人才培养项目2017YQ072;上海市青年科技英才扬帆计划项目19YF1449000

在线出版日期：2019-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：67-72